常見(jiàn)的流式檢測(cè)與分析應(yīng)用

  這期上海東寰主要給大家講解一下幾種常見(jiàn)的流式檢測(cè)。歡迎大家的查閱！

  1、免疫細(xì)胞分型:隨著基因表達(dá)技術(shù)的誕生，新的單抗以及熒光素的獲得，同一樣本檢測(cè)多個(gè)marker（很常見(jiàn)的人外周血免疫細(xì)胞分型），或者多個(gè)參數(shù)確定目的細(xì)胞（如Treg細(xì)胞）通過(guò)多色流式得以實(shí)現(xiàn)?；诹魇郊?xì)胞術(shù)的多指標(biāo)高通量檢測(cè)特點(diǎn)，同樣也能實(shí)現(xiàn)對(duì)多種胞內(nèi)或胞外細(xì)胞因子的檢測(cè)，很大程度的節(jié)省樣本量，縮短人工操作時(shí)間，做到準(zhǔn)確定量分析。

  2、免疫功能檢測(cè)(胞內(nèi)細(xì)胞因子/胞外多因子檢測(cè))：細(xì)胞因子作為細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)的分子，主要介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)，通過(guò)調(diào)節(jié)免疫促進(jìn)與免疫壓制的動(dòng)態(tài)平衡，維持機(jī)體免疫系統(tǒng)的穩(wěn)定。檢測(cè)細(xì)胞因子對(duì)于某些疾病的診斷、醫(yī)治具有重要價(jià)值。胞內(nèi)細(xì)胞因子反映分泌功能，胞外（血清、細(xì)胞培養(yǎng)液、灌洗液等）細(xì)胞因子反映分泌水平。胞外多因子檢測(cè)基于雙抗體夾心法，優(yōu)于傳統(tǒng)的ELISA方法，“多、快、好、省”。可同時(shí)檢測(cè)13種細(xì)胞因子，從實(shí)驗(yàn)操作到獲得數(shù)據(jù)結(jié)果只需要8個(gè)小時(shí)，且靈敏度高，特異性強(qiáng)；每個(gè)樣本只需25μl就能夠同時(shí)檢測(cè)13個(gè)指標(biāo)，很大程度節(jié)省了樣本的用量及實(shí)驗(yàn)費(fèi)用。

  3、細(xì)胞功能檢測(cè)(細(xì)胞增殖/活力/凋亡/周期)：細(xì)胞功能反映在應(yīng)激干預(yù)（如藥物、輻射等）下，引起細(xì)胞活化增殖、或促進(jìn)凋亡、阻滯在細(xì)胞周期某個(gè)階段等?？深A(yù)測(cè)應(yīng)急干預(yù)是如何作用于細(xì)胞層面，進(jìn)行下一步機(jī)理研究。

  4、植物倍性/基因組大小檢測(cè)：植物有效的倍性鑒定是了解其遺傳背景及發(fā)育研究的基礎(chǔ)。而基因組大小具有物種相對(duì)特異性和穩(wěn)定性，是生物基因組多樣性的基本參數(shù)。目前很快速且有效地鑒別植物倍性及基因組大小的方法是采用流式細(xì)胞儀（FCM）測(cè)定法。獲得大致基因組大小范圍再用于后續(xù)的準(zhǔn)確測(cè)序。

  5、高通量細(xì)胞分選：經(jīng)流式分選得到的目的細(xì)胞，可為擴(kuò)增、高通量單細(xì)胞測(cè)序、Smart-seq、RNA-seq、ATAC、蛋白檢測(cè)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供高質(zhì)量的樣本來(lái)源?？蓾M足6-1536孔板，每孔一個(gè)細(xì)胞的高通量分選。

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