免疫沉淀(IP/ChIP)技術(shù)服務(wù)
(DH1005)
一.服務(wù)內(nèi)容
1、蛋白提取及沉淀處理:從人或動(dòng)物細(xì)胞、組織,細(xì)胞等樣品中提取蛋白樣品。
2、蛋白定量:對(duì)樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析。
3、Western Blot檢測(cè)
(1)電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品。
(2)濕法轉(zhuǎn)印。
(3)雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白。
(4)顯色:ECL熒光顯色,黑條帶白背景照片
4、進(jìn)行蛋白內(nèi)參檢測(cè)(所有內(nèi)參抗體均不收取費(fèi)用)。
5、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
二. 樣品要求
1、細(xì)胞>1×10^7;組織>30mg;細(xì)菌濕重>1mg等。
2、樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品。
3、建議提供目的蛋白陽(yáng)性表達(dá)樣品(純蛋白、有陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞或組織、商品化的陽(yáng)性對(duì)照產(chǎn)品等)作為陽(yáng)性對(duì)照。
注:若有特殊處理的樣品,請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。
三. 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
服務(wù)項(xiàng)目 |
免疫學(xué)檢測(cè) |
服務(wù)內(nèi)容 |
周期 |
產(chǎn)物/報(bào)告 |
價(jià)格(元) |
01 |
免疫沉淀(IP/ChIP) |
客戶提供樣本和抗體雙方商定方案 |
咨詢 |
完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |
咨詢 |
02 |
免疫沉淀(IP) |
客戶提供樣本和抗體雙方商定方案 |
咨詢 |
完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |
咨詢 |
四、客戶提供材料
1、樣品:新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關(guān)的必要資料(具有保密性的材料除外)。
2、目的蛋白相應(yīng)一抗:請(qǐng)您提供質(zhì)量保證的一抗(或委托我公司準(zhǔn)備)。抗體的使用量通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行確認(rèn),原則上不回收使用一抗。
3、陽(yáng)性對(duì)照樣品(盡量提供)。
4、相關(guān)文獻(xiàn)(可選)。
注:若要檢測(cè)磷酸化蛋白,請(qǐng)?jiān)?-3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行,因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測(cè)不到磷酸化條帶。
五、提交給客戶結(jié)果
1、預(yù)實(shí)驗(yàn)顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),預(yù)實(shí)驗(yàn)采取3個(gè)一抗稀釋度,選取部分實(shí)驗(yàn)樣本。
2、正式實(shí)驗(yàn)顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。
3、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
六、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明
1、提供的蛋白量與待檢測(cè)的目的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加。
2、每張膜樣品數(shù)量為1-8個(gè),不足8個(gè)以8個(gè)收取。9-16個(gè)樣品為2張膜,17-24個(gè)樣品為3張膜;以此類推。
舉例:7個(gè)樣品,1個(gè)目的蛋白,算1張膜;有9個(gè)樣品,1個(gè)目的蛋白,算2張膜;7個(gè)樣品,2個(gè)目的蛋白,算2張膜,有9個(gè)樣品,2個(gè)目的蛋白,算4張膜。
注:以上為一般算法。如果客戶樣品數(shù)量需要按照組別等來(lái)進(jìn)行上樣時(shí),需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數(shù)。
3、選擇部分樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),參考目的蛋白一抗說(shuō)明書進(jìn)行3個(gè)稀釋度的預(yù)實(shí)驗(yàn)。
4、向客戶反饋預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,等待客戶確認(rèn)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果后確定是否進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。
5、內(nèi)參檢測(cè)為:β-actin,GAPDH等。
8、對(duì)條帶結(jié)果有特殊要求,請(qǐng)另詢價(jià)。
9、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動(dòng)預(yù)實(shí)驗(yàn)。
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