兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定
目的:
從兔主動(dòng)脈中分離出原代平滑肌細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、鑒定;
一、材料:
3-8周齡兔、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、75%酒精、雙抗PBS、DMEM、FBS、培養(yǎng)皿、15ml離心管;
二、方法:
1)空氣栓塞致死,無菌條件下取出主動(dòng)脈,PBS反復(fù)清洗;
2)洗干凈后用小鑷子剝除外膜纖維結(jié)締組織,用眼科剪將血管縱行剪開,眼科彎鑷刮除血管內(nèi)膜和肌層,以去除內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞,剩余的為外膜;
3)浸泡于PBS中并沖洗干凈,剪成約 1mm 的組織塊 ,將移入培養(yǎng)瓶,擺布均勻,翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使瓶底向上,組織塊位于培養(yǎng)瓶上方,加人 4~5mL含 20%FBS的 DMEM培養(yǎng)液,旋松瓶口,放入 CO2 孵箱培養(yǎng);
4)3~4h后輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使組織塊浸人培養(yǎng)液中,絕對(duì)靜置培養(yǎng)3d,4~6d后換液,可見散在、梭形細(xì)胞從組織塊邊緣爬出,8~10d 出現(xiàn)致密細(xì)胞層 ,隔天換液 1次;
三、鑒定:
陽性:α-SMA Desmin
陰性:Vimentin
| 国产精品久久久久久中文字 | 最好看的中文在线观看 | ,一级婬片A看免费 | 国产肥白大熟妇BBBB视频 | 国产又大又黄的视频 | 欧美三级三级三级爽爽爽 | 国产裸体无遮挡永久观看 | 特黄特黄特黄特黄特级片 | 午夜福利视频1000 | 日本A V在线播放 | 秋山静香一区二区三区网站 | 丰满少妇一级毛片免费观看 | 中文字幕熟女人妻偷伦天美 | 国产拍在线观看不卡 | 99久久无码国产精品性出奶 | 丁香五月婷婷中文字幕 | 国产无套一区二区三区网站 | 又大jizz又粗又硬又爽又黄毛片视频 | 国产人成视频在线观看 | 国产精品JIZZ在线观看99 | 精品一级A片一区二区免费视频 | 亚洲精品久久久中文字幕 | 欧美91看片特黄AAAA | 91亚洲精品国偷拍 | 嫩BBB搡BBB搡BBB搡 | 亚洲综合成人在线 | 囯产精品久久久久久久久 | 在线观看高清无码 | 国产精品无码人妻一区二区在线 | 国产人妻 精品无码免费 | 成人A片产无码免费视频奶头红杏 | 在线观看亚洲视频 | 成人纯肉无码在线观看 | 成人无码AAAA一片黄 | 一区二区三区在线观看国产 | 欧美成人做爰高潮片免费看借种 | 91成人无码看片在线观看网址 | 亚洲国产精品人人做人人爽 | 国产精品区级88844 | 17C一起草在线观看入口 |